何谓正相色谱和反相色谱？在应用上有什么特点

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2023/12/1 163次浏览

1、正相色谱基本上可以被看做是液固吸附色谱，其柱填料是吸附剂，其表面上分布有活性吸附位点，溶剂和溶质分子均能被吸附于活性位点上。由于相互作用力有大有小，溶剂分子与溶质分子、溶质分子相互之间又存在竞争吸附，从而造成了在柱内保留时间的差异，使不同物质得到分离。

应用特点：正相色谱一般用来分离中性化合物和离子(或可电离的)化合物，而且以中性样品为主。适于分离样品如下：

①对于反相色谱法很难分离的异构体，可以采用以硅胶为固定相的正相色谱分离分析；

②根据被分离样品极性差别进行族类分离；

③易于水解样品的分离分析；

④分离分析高脂溶性样品，其在极性有机溶剂中溶解度很小；

⑤正相色谱也可以用于异构体分离(包括几何异构体和光学异构体)。

2、流动相极性大于固定相极性的情况，称为反相色谱。非极性键合相色谱可作反相色谱。在现代液相色谱中应用最广泛，现代液相色谱分析工作的70%以上是在非极性键合固定相上进行的。反相介质性能稳定。分离效率高，可分离蛋白质、肽、氨基酸、核酸等含有非极性基团的各种物质。

应用特点：反相介质性能稳定。分离效率高，可分离蛋白质、肽、氨基酸、核酸、甾类、脂类、脂肪酸、糖类、植物碱等含有非极性基团的各种物质。

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