正相色谱:流动相极性小于固定相极性
反相色谱:流动相极性大于固定相极性
正相色谱用的固定相通常为硅胶,以及其他具有极性官能团,如胺基团和氰基团的键合相填料。由于硅胶表面的硅羟基或其他团的极性较强,因此,分离的次序是依据样品中的各组份的极性大小,即极性强弱的组份最先被冲洗出色谱柱。正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低,如:正乙烷、氯仿、二氯甲烷等。
反相色谱填料常是以硅胶为基础,表面键合有极性相对较弱的官能团的键合相。反相色色谱所使用的流动相极性较强,通常为水,缓冲液与甲醇,已腈等混合物。样品流出色谱柱的顺序是极性较强组合最先被冲出,而极性弱的组份会在色谱柱上有更强的保留。常用的反相填料有C18、C8、C4、C6H5等。
以上样品出峰顺序为一般情况,而鉴于实际应用中影响色谱峰的诸多因素,可能会违背以上一般规律。因此欲深入详细的了解,建议参考相关书籍。
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